作者:王玉風(fēng)??楊?俠??董曉光?
??? 發(fā)表時(shí)間:眼科新進(jìn)展??2012年6月?第32卷??第6期?????
??? 【摘要】??
??? 目的?觀察高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human?umbilical?vein?endothelial?cells,HUVEC)中玻連蛋白(vitronectin,VN)表達(dá)的變化、細(xì)胞微絲骨架的改變以及細(xì)胞遷移能力、成管能力的變化。?
??? 方法?建立高糖培養(yǎng)的HUVEC體外模型,并常規(guī)培養(yǎng)HUVEC作為正常對(duì)照,Western?blot方法檢測(cè)VN蛋白的表達(dá),免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法觀察HUVEC中微絲骨架F-actin的變化,劃痕法檢測(cè)HUVEC遷移能力的改變,Matrigel法檢測(cè)HUVEC的成管能力。?
??? 結(jié)果?培養(yǎng)24h時(shí),正常組和高糖組中VN蛋白表達(dá)量分別為0.893±0.119、1.295±0.080,48h時(shí)分別為0.874±0.115、1.724±0.098,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-4.857、-9.710,均為P<0.05)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示培養(yǎng)24h、48h時(shí)高糖組中都伴有更加明顯的細(xì)胞微絲骨架結(jié)構(gòu)改變。劃痕法檢測(cè)培養(yǎng)24h時(shí)正常組和高糖組中遷移到劃痕內(nèi)的細(xì)胞數(shù)分別為(198.000±15.880)個(gè)、(242.000±11.130)?個(gè),48h時(shí)分別為(293.000±8.681)個(gè)、(334.000±10.863)個(gè),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.495、-7.193,均為P<0.05)。Matrigel法發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)6h時(shí)高糖組中形成的閉合管腔數(shù)目(120.000±9.813)個(gè)多于正常組(91.000±9.867)個(gè),12h時(shí)形成的閉合管腔數(shù)目(19.000?±3.209)個(gè)也多于正常組(8.000±3.011)個(gè),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.163、-5.659,均為P<0.05)。?
??? 結(jié)論?VN可能在糖尿病視網(wǎng)膜病變中起一定作用,且VN功能的發(fā)揮可能涉及到細(xì)胞骨架重塑,但需要進(jìn)一步干擾VN的表達(dá)以證實(shí)其作用。?